产品简介

MTS 试剂是常见的水溶性四唑盐试剂之一，广泛用于通过吸收分光光度法对细胞活力进行定量分析。

多种四唑内盐可用于增殖实验中的细胞活力测定，其原理是通过监测这些试剂的颜色变化来实现的。代谢活跃的细胞会将无色的四唑内盐还原为有色的甲臜产物，而根据四唑盐试剂结构的不同，这些甲臜产物在细胞培养基中可能可溶，也可能不溶。四唑内盐向甲臜的转化被认为是由依赖于 NAD（P）H 的脱氢酶完成的。

示例方案

概览
在透明底 96 孔板中制备细胞。

按需求处理细胞。

向每个孔中加入 20 µL 的 ReadiUse™ MTS 试剂工作液。

在 37°C 下孵育 1-4 小时。

储备液的制备

除非另有说明，所有未使用的储备液在制备后应分装成单次使用量，并储存在 - 20°C。避免反复冻融

ReadiUse™ MTS 试剂工作液

制备 ReadiUse™ MTS 试剂工作液时，向 ReadiUse™ MTS 试剂中加入 PMS 溶液（未提供），使 PMS 的最终浓度在 200 µM 至 1000 µM 之间。PMS 的最佳最终浓度可根据实验要求进行调整。

示例实验方案

细胞增殖和细胞毒性测定

1.在透明底组织培养微孔板中每孔接种 5000 至 10,000 个细胞。96 孔板建议总容积为 100 µL，384 孔板为 50 µL。

2.向细胞中加入测试化合物，并在 37°C、含 5% CO₂的 humidified 培养箱中孵育所需时间（例如 24、48 或 96 小时）。对于空白孔（不含细胞的培养基），加入相同体积的测试化合物。96 孔板建议总容积为每孔 200 µL，384 孔板为每孔 100 µL。

注意：最佳细胞密度应针对每种细胞系单独确定。对于增殖测定，接种较少的细胞；对于细胞毒性测定，从较多数量的细胞开始。

3.向 96 孔板的每个孔中加入 20 µL ReadiUse™ MTS 试剂工作液，384 孔板每孔加入 10 µL。

4.将平板在 37°C 下孵育 1 至 4 小时，避光。

注意：根据细胞类型和浓度，最佳孵育时间可能在 30 分钟至过夜之间。根据具体实验设置调整孵育条件。

5.用吸光度读板仪监测 490 nm 处的吸光度增加。

细胞计数测定

1.在透明底组织培养微孔板中接种细胞。96 孔板建议每孔总容积为 100 µL，384 孔板为 50 µL。

注意：在透明底 96 孔板中制备了 HeLa 和 Jurkat 细胞的系列稀释悬液用于测定。

2.向 96 孔板的每个孔中加入 10 µL ReadiUse™ MTS 试剂工作液，384 孔板每孔加入 5 µL。

3.将平板在 37°C 下孵育 1 至 4 小时，避光。

注意：根据细胞类型和浓度，最佳孵育时间可能在 30 分钟至过夜之间。根据具体实验设置调整孵育条件。

4.用吸光度读板仪监测 490 nm 处的吸光度增加。