蛋白质糖基化分析技术是研究蛋白质糖基化修饰的方法，通过揭示蛋白质分子上的糖基化状态和糖链结构帮助研究者理解这一关键翻译后修饰在生物学功能中的作用。糖基化是蛋白质最常见且最复杂的翻译后修饰之一，它参与了许多生物学过程，如细胞间通讯、蛋白质折叠、稳定性调节和免疫应答等。蛋白质糖基化是指糖链通过特定酶的作用附着到蛋白质的特定位点上，常见的糖基化类型包括N-糖基化（糖链与天冬酰胺残基连接）和O-糖基化（糖链与丝氨酸或苏氨酸残基连接）。这一修饰显著影响蛋白质的理化性质，例如提高蛋白质的溶解性、稳定性或改变其三维结构。此外，糖基化修饰还广泛参与调节细胞识别、信号转导和病原感染等过程，糖基化的异常通常与疾病密切相关。例如，癌细胞表面糖基化模式的变化是其侵袭性增强的标志之一，而糖尿病和神经退行性疾病中也观察到异常的糖基化现象。因此，蛋白质糖基化分析技术不仅有助于揭示疾病发生的分子机制，还为开发疾病早期诊断标志物和靶向治疗策略提供线索。

一、蛋白质糖基化分析技术的流程

蛋白质糖基化分析技术通常包括样本准备、糖链释放与富集、质谱分析及数据解读等步骤。

1、样本准备

糖基化分析的样本通常是血清、组织、细胞裂解液或纯化蛋白。为确保糖基化修饰的完整性，实验要求在低温和抑制酶活条件下进行。

2、糖链释放与富集

糖链的释放是糖基化分析的关键步骤，例如通过使用N-糖苷酶F（PNGase F），可以高效释放蛋白质上的N-糖链，随后利用富集技术（如凝集素亲和富集或固相萃取）选择性捕获糖基化的蛋白质或游离糖链。

3、质谱分析

高分辨率质谱仪是分析糖基化修饰的核心工具，常用的方法包括液相色谱-质谱联用（LC-MS/MS）和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）。这些技术能够对糖链的组成、结构及其附着位点进行高灵敏度、高分辨率的表征。

4、数据解读与生物信息学分析

糖基化数据的分析需要结合专业数据库（如GlyTouCan或UniCarb-DB），通过比对鉴定糖链结构和糖基化位点，并将其与生物学功能关联起来。

二、蛋白质糖基化分析技术的优势与局限性

蛋白质糖基化分析技术具有多种优势。首先，质谱技术的高灵敏度和高分辨率使其能够全面表征复杂的糖链结构和糖基化位点。其次，结合生物信息学工具，研究者可以在海量数据中快速提取关键生物信息。但是糖基化分析也存在一定的技术挑战，例如糖链的化学结构复杂且异构体较多，分析过程需要高水平的实验技术和丰富的经验。此外，不同样本中糖基化的动态范围较广，对样本前处理的要求较高。

百泰派克生物科技专注于提供专业的糖基化分析服务，我们结合高分辨率质谱技术和先进的生物信息学工具，致力于为客户提供高质量的糖基化分析解决方案。

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

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